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及時的清洗凝膠色譜柱是很重要的

更新時間:2022-11-03      點(diǎn)擊次數(shù):794
  為了不使被測物質(zhì)和雜質(zhì)停留在凝膠色譜柱中,在每次的樣品分析工作完成之后,都應(yīng)及時地清洗色譜柱。
 
  首先要用對被測樣品洗脫能力強(qiáng)的溶劑來洗脫色譜柱,以分析工作中常用的反相色譜分析法為例,因其先流出的物質(zhì)是極性大的物質(zhì),此時應(yīng)用100%的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內(nèi)的極性小的物質(zhì)洗脫下來,洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可。
 
  如果流動相是緩沖溶液,則應(yīng)先用蒸餾水來沖洗色譜柱,以沖掉柱內(nèi)的鹽,然后再用合適的溶劑來沖洗。
 
  凝膠濾過色譜法中所使用的凝膠色譜柱常用緩沖溶液做流動相,用完之后當(dāng)然要用蒸餾水來沖洗。
 
  如果是連續(xù)操作,可以將緩沖溶液置于柱內(nèi)過夜,但最好是維持小流速(<0.5ml/min)以防止緩沖鹽的析出,如果流動相中含有鹵化物,即使是停一夜,也必須要用蒸餾水將色譜柱沖洗干凈,以防止它們對柱體的腐蝕。

 


 
  下面讓我們來看看如何防止氣體進(jìn)入凝膠色譜柱吧。
 
  凝膠色譜柱是不允許氣泡進(jìn)入的,否則將會使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室。因此,為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱,一定要使用經(jīng)過脫氣的流動相,并且要嚴(yán)格按照下列步驟來安裝色譜柱:
 
  1、拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲,觀察是否有溶劑滲出;
 
  2、如有溶劑滲出,即可將色譜柱接到管路上,以避免氣泡的進(jìn)入;
 
  3、如無溶劑滲出時,表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了,此時,可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上,以流動相來反方向沖洗色譜柱,以便將柱內(nèi)的空氣排除。最好以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱,如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會導(dǎo)致柱性能的降低;
 
  4、如果流出的溶劑里不含有氣泡,說明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了,再將色譜柱以正確的方向接好,這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。
 
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